血清E-钙黏附素在胃癌中表达及意义

E-钙黏附素(epithelialcadherin，E-Cd)又称上皮钙黏附素，属钙黏附素超家族经典亚族成员，它的表达程度与活性状态直接影响肿瘤细胞的脱离和再附着[1]，本文通过检测20例正常人，20例胃癌术后患者和80例胃癌患者治疗前、后的血清中可溶性E-CD（sE-Cd），同时测定血清中CEA和CA19-9水平,分析sE-Cd在正常人、胃癌患者治疗前和治疗后变化规律，评价sE-Cd与胃癌病理特点的关系和对临床的指导作用。河南省肿瘤医院普外科谢建国

1 对象与方法

1.1对象 胃癌80例，所有病例通过胃镜检查及术前病理确诊，术后病理进一步证实。其中Ⅰ期～Ⅱ期患者29例（36.3%），Ⅲ～Ⅳ期51例（63.8%），贲门胃体部34例（42.5%），胃窦及胃小弯46例（57.5%）。术前检查均未发现明显心、肝、肺、肾等重要脏器的器质性病变，术前和术后2w未行放疗、化疗或生物治疗。胃癌术后复发患者20例，其中在8个月至1年7例（35%），1年至2.5年复发13例（65%）。另择20名健康人员作为对照组。所有被检者年龄在83-31岁之间，男女比为2:1，各组间的年龄均数均无显著性差异(P >0.05)。

1.2 方法：取外周血2m1，待其凝固后，1 h内5 000r／min离心5 min，取上清液放入Eppendorf导管，置－70℃冰箱内保存待用。血清中sE-Cd浓度用酶联免疫吸附(ELISA)试验测定。其检测试剂药盒购于Sigma公司，酶标仪为美国Bio2Rad550。胃癌患者术前5d～7d测定其血清中sE-Cd，术后7d，14d 复查血常规正常后再次分别测定血清中sE-Cd 的浓度，同时测定血清中CEA和CA19-9的浓度。CEA IRMA药盒(Syntron公司，美国)CA19-9检测盒（迈新生物技术公司）。胃癌复发患者复查时抽血测定。

1.3．统计学方法 统计软件采用SPSS 13.0，数值定量资料首先进行正态检验，正态分布数据以样本均值 标准差（ ）表示，χ2检验比较两组阳性率，定量资料的两组间比较采用成组设计t检验，检验水准α=0.05。

2 结 果

2.1 胃癌组和对照组sE-Cd ,CEA和CA19-9浓度比较：对照组血清中sE-Cd 平均浓度为(3.8±1.5)mg／L，胃癌组为(6.4±2．0)mg／L。以大于5．80 mg／L为阳性。胃癌组阳性数为 (83％)，对照组为例(4％)。对照组与胃癌组血清中sE-CD浓度差异有统计学意义(t=5.554,P＜0.001)；胃癌患者CEA 以小于3.5ng／ml为正常，CA19-9以小于30U/ml为正常，见表1。

表1   胃癌组和对照组sE-Cd ,CEA和CA19-9浓度比较( ±s)

Tab1  Serum concentration sE-Cd,CEA and CA19-9 in three groups( ±s)

group      n   sE-Cd（mg/L）     CEA(ng/ml)       CA19-9(U/ml)   

GC        20    3.8±1.5         1.6±1.7         20.4±10. 6

GGA       80    6.4±2.0         10.2±32         114.4±98.6

RGA       20    6.9±1.8         12.4±55.4       81.6±242.2

注：GC为对照组，GGA为胃癌组，胃癌复发组。

2.2 胃癌sE-Cd ，CEA及CA19-9水平与胃癌临床特点的关系：胃癌患者中肿瘤Ⅰ期为7.5%（n=6）Ⅱ期30.0% (n=23)，Ⅲ期47.5%(n=38),Ⅳ期13.8% (11)例。Ⅰ期与Ⅱ期比较两者无差异（P>0.05），Ⅲ期与Ⅳ期相比无差异(P>0.05)；Ⅰ期与Ⅱ期与Ⅲ期与Ⅳ期比较，两者差异有统计学意义(t=6.160，P<0.01)，其sE-Cd，CEA及CA19-9水平见表2；肿瘤位于贲门(n=13),胃体(n=21),胃窦(n=46),其中sE-Cd表达阳性分别为9,16和40例。三者差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2  sE-Cd，CEA及CA19-9水平与胃癌病理特点的关系( ±s)

Tab2  Relationship between Serum concentration sE-Cd,CEA and CA19-9 and

patho-characteristic of GA ( ±s)

patho-characteristic    n   sE-Cd（mg/L）   CEA(ng/ml)     CA19-9(U/ml)  

High/mid differentiation    52  5.8±1.8           6.8±16.6         29.3±51.0

Low/ undifferentiation     38  6.2±1.6            4.9±11.2         101.9±194.6

Ⅰstage              6   4.8±2.1           4.2±4.9          21.6±32.

Ⅱstage             24   5.4±1.8           21.3±45.3        78.2±192.2

Ⅲstage             38   6.5±1.7           4.4±6.7          196.3±174.5

Ⅳstage             11   7.2±1.8           26.9±58.8        142.7±230.3

3．胃癌患者手术前后血清中sE-Cd, CEA和CA19-9浓度比较：胃癌手术后血清中sE-Cd浓度下降较为明显，胃癌患者术前sE-Cd平均浓度与术后平均浓度差异有统计学意义(P<0.01)；术后7d和14d之间sE-Cd平均浓度差异无统计学意义(P<0.05)；血清CEA, CA19-9浓度术后血清浓度也呈下降趋势，术前和术后7d相比，无统计学意义（P>0.05），而术前血清浓度和术后14d相比，差异具有统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3手术前后胃癌患者sE-Cd CEA、及CA19-9水平比较( ±s) 

Tab3 Preoperative and postoperative serum concentration sE-Cd,CEA

 and CA19-9 ( ±s)

Group              sE-Cd（mg/L）   CEA(ng/ml)    CA19-9(U/ml)  

Preoperative        6.4±1.8      11.2±23.4    43.4±130.5

Postoperative 7d    4.2±2.2*      9.6±10.2     39.8±82.0

postoperative 14d   3.8±2.4**      2.1± 4.8     23±54.6

* 与术前t=4.289 P<0.001,**术后7d与术后14d比，t=1.96, P>0.05

3 讨论

随着对恶性肿瘤的浸润、转移的研究发现，其浸润转移关键步骤是瘤细胞脱离原发灶并再附着转移部位，E-Cd等钙黏附素主要介导正常和肿瘤组织中细胞间的黏附，目前对E-Cd表达的研究涉及多种人体肿瘤，已包括结直肠癌、肝癌、乳腺癌、前列腺癌等[3]，E-Cd编码基因位于16q22.1。血清sE-Cd系细胞内E-Cd的降解物，是一种分子量为80kDa的多肽跨膜糖蛋白，存在于正常人的血循环中，文献报道其浓度为2.5-5.6mg/L之间，但在恶性肿瘤患者中的浓度明显升高，介于4.7-9.3mg/L之间[4]。1983年Damsky等研究人员在人乳腺癌细胞MCF-7无血清培养液中发现E-Cd，在临床检测结果表明较正常人水平升高，并提出这个指标可用于肿瘤患者愈后的观察指标，且推测该片段在血清中出现可能是因为肿瘤细胞存在蛋白分解作用的结果。血清癌胚抗原(CEA)是由肿瘤组织产生的肿瘤标志物，对消化道恶性肿瘤的诊断和预后具有较重要的临床价值。CEA作为肿瘤相关抗原，由于敏感性低，主要用于结直肠癌患者术后复发的监测和对治疗反应的观察。研究发现，胃癌患者CEA的含量不仅高于正常人，而且与胃癌的临床分期及肿瘤的转移有关[5]。糖类抗原19-9（CA19-9）是一种与Lewis血型物质有关的糖类抗原，在消化道肿瘤中以胰腺癌和胆管癌的敏感性较高，表达可在70%以上，但在其它肿瘤中其敏感性在20%～50%之间[6]。

国外研究显示前列腺癌、肺癌以及胃癌患者血清中存在有较高水平的sE-Cd，术后血清sE-CD水平迅速下降。sE-Cd血清中的浓度也影响着结直肠癌的浸润深度和淋巴结转移[7],本组研究结果证实，胃癌患者在未接受任何治疗之前，其血清中sE-Cd明显升高，与正常对照组差异有统计学(P<0．01)，同时，研究表明，血清中sE-CD的浓度与胃癌的浸润程度及肿瘤分期有明显的关系，Ⅲ期与Ⅳ期患者血清中sE-CD的浓度明显高于Ⅰ期与Ⅱ期患者(P<0．01)，表明sE-CD浓度可间接提示肿瘤的侵润深浅成度和淋巴结转移的情况，反映出胃癌的发生与发展，但与胃癌发生的部位无明显相关关系。因此，血清sE-Cd的水平升高，对识别局部和区域淋巴结转移有一定的意义[9]，对判断胃癌部位无参考意义。胃癌术后患者sE-Cd的浓度下降，与术前相比下降差异有统计学意义(P<0．01)，术后复发的病例同样伴有sE-Cd升高，表明检测sE-Cd浓度对判定胃癌患者术后又无复发有一定的意义，我们在临床上有可和CEA,CA19-9一起作为判定胃癌术后复发的指标之一，起到早期发现胃癌术后复发的作用。Chan et al[10]研究发现胃癌患者血清sE-Cd浓度的对数均值显著高于对照组，认识到该指标的升高与胃癌的生长方式和远处转移密切相关,一般胃癌手术后肿瘤复发3～6月即可测到sE-Cd水平升高，而临床出现复发表现则为13个月。因此，sE-Cd的监测可及早发现肿瘤复发，为胃癌复发后的辅助化疗和综合治疗赢得时间。

鉴于血清sE-Cd浓度与胃癌的侵袭性、肿瘤的分期和肿瘤的复发有一定的相关性，我们认为，术前全面分析胃镜，同时结合检测血清sE-Cd浓度，可能有助于评估胃癌的恶性演进状态,对胃癌患者的早期诊断、综合治疗和判定胃癌根治术后的预后具有一定的指导意义，特别是对术后早期复发的患者，结合肿瘤标志物的检测，可及早作出诊断使患者得到合理的治疗。但sE-Cd是否与胃癌特异性相关，以及sE-Cd能否成为特异性肿瘤标记物，尚需从E-Cd的分子生物学等多方面作深入的探讨。